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在應(yīng)用ELISA時，首先要清楚下面內(nèi)容：我們測定ELISA試劑盒到底是檢測抗體還是抗原？根據(jù)天津睿創(chuàng)實(shí)驗過程分析，對這兩種抗體，抗原分別作了測試，大家可以根據(jù)我們給出的結(jié)果做個對別，從而分辨出ELISA試劑盒到底是檢測抗體還是抗原？1.檢測抗原常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法。但競爭法在具體實(shí)驗中有些困難，特別是檢測微生物的抗原，因為需要標(biāo)記抗原，這對于某些抗原是很難做到的，甚至是不可能的。另外在競爭法中，酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中...

內(nèi)源性干擾因素，包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等。一、類風(fēng)濕因子在類風(fēng)濕患者及正常人血清中，常含有較高或不同濃度的類風(fēng)濕因子(RF)，其一般為IgM型，亦有IgG和IgA型，具有與變性IgG產(chǎn)生非特異結(jié)合的特點(diǎn)，因為在ELISA測定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后加入的酶標(biāo)的特異抗體IgG結(jié)合，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。避免其發(fā)生的方法有：1.用F(ab)2替代完整的IgG。2.標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理。3.檢測抗...

依賴核酸序列的擴(kuò)增技術(shù)（NASBA)是在PCR基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù)，是由1對帶有T7啟動子序列的引物引導(dǎo)的連續(xù)、等溫、基于酶反應(yīng)的核酸擴(kuò)增技術(shù)，反應(yīng)在41℃進(jìn)行，可以在2h左右將模板RNA擴(kuò)增約109倍，比常規(guī)PCR法高1000倍，不需特殊的儀器。該技術(shù)一出現(xiàn)就被用于疾病的快速診斷和病人血清中HIV-1的定量檢測。盡管RNA的擴(kuò)增也可以使用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)(通過反轉(zhuǎn)錄形成單鏈DNA模板)，NASBA相比則有自己的優(yōu)勢：可以在相對恒溫的條件下進(jìn)行（一般恒溫為41℃）。該技...

elisa試劑盒根據(jù)其應(yīng)用和設(shè)計可以分為以下幾類：一、直接elisa試劑盒：*特征：使用標(biāo)記有酶的抗體直接與樣本中的抗原結(jié)合，無需二抗。*優(yōu)點(diǎn)：操作簡便，反應(yīng)時間短。*缺點(diǎn)：可能存在抗體與抗原結(jié)合位點(diǎn)的競爭，影響靈敏度。二、間接elisa試劑盒：*特征：使用未標(biāo)記的抗體捕獲樣本中的抗原，然后使用標(biāo)記有酶的二抗進(jìn)行檢測。*優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，可以通過使用不同的二抗來放大信號。*缺點(diǎn)：操作步驟較多，可能增加背景噪音。三、夾心elisa試劑盒（三明治ELISA）：*特征：使用兩種抗體，...

在人細(xì)胞ELISA試劑盒實(shí)驗中，我們或多或少會遇到樣本濃度接近試劑盒靈敏度，樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，尤其是血清和血漿樣本，這可能是基質(zhì)效應(yīng)的結(jié)果。那么什么是基質(zhì)效應(yīng)呢？基質(zhì)是指除目標(biāo)分析物之外的樣品部分。因為基質(zhì)成分會顯著干擾分析過程，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。這些效應(yīng)在業(yè)內(nèi)統(tǒng)稱為矩陣效應(yīng)。這是人細(xì)胞ELISA試劑盒研發(fā)和使用中需要避免的雷。當(dāng)單個樣品或少量樣品的數(shù)值低于空白值時，可能是實(shí)驗操作中出現(xiàn)了問題。這時候就要增加重復(fù)，提高操作技術(shù)。當(dāng)許多樣品低于空白值時，應(yīng)考...

熒光定量PCR的應(yīng)用領(lǐng)域：1、核酸定量分析:對傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2、基因表達(dá)差異分析:比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時相的表達(dá)差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證3、SNP檢測:檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個體對不同疾病的易感性或者個體對特定藥物的不同反應(yīng)有著重要的意義，因分子信標(biāo)結(jié)構(gòu)的巧...